Evaluación in vitro de la motilidad de huevos larvados de Toxocara canis luego de la exposición a compuestos metálicos de transición, ligandos derivados de azoles y Soluvet®.

Toxocara canis es un parásito intestinal que tiene como hospedero definitivo al perro y sus congéneres. Es el principal causante, junto con Toxocara cati, de la enfermedad conocida como toxocariosis en humanos, una de las helmintiasis con mayor prevalencia a nivel mundial en países industrializados (Chen et al., 2012). Esta enfermedad puede ser asintomática o puede mostrar síndromes clínicos causados por la migración de la larva de Toxocara spp. a través del sistema circulatorio y diversos órganos internos, mismo que varían de acuerdo a la intensidad de la infección y la capacidad del sistema inmune para contrarrestar la infección (Macpherson, 2013). Una de las principales fuentes de infección por huevos de Toxocara spp. que logran desarrollarse hasta el estado infectivo L2 para el humano, es su fácil distribución a través de las heces de perros, gatos y otras especies de canídeos (Overgaauw, 2013). Los huevos de Toxocara canis son casi esféricos y miden de 75-90 µm. Poseen una cubierta gruesa y rugosa con varias capas concéntricas. Son de color marrón oscuro, no segmentados y su contenido ocupa prácticamente todo el interior. Tienen una cubierta compuesta por tres capas: interna o lipídica, media o quitinosa y externa o vitelina, que le confieren la impermeabilidad a cualquier sustancia que no sea gas o disolvente lipídico. Las drogas antihelmínticas mayormente usadas para el tratamiento de la toxocariasis humana pertenecen al grupo de los benzimidazol-carbamatos (Pawlowski, 2001), sin embargo, tienen una biodisponibilidad baja en los tejidos, debido a su extremadamente baja solubilidad (Hrckova et al., 2001). Las soluciones superoxidadas electrolizadas (SSO) son soluciones ácidas, carentes de color con un alto potencial de reacción óxido-reducción (Tanaka et al., 1996). En el caso de la producción de soluciones con pH neutro, el agua es tratada con características fisiológicas específicas y una solución saturada de cloruro de sodio grado reactivo es sometido a un proceso de electrólisis controlada para la generación de iones. La ventaja de estos procesos es que resulta una solución con un pH neutro de 6.4 a 7.5, con capacidad de oxidación-reducción de +800 a +900 mV (Durán, 2010)

Evaluación biológica in vitro de compuestos derivados de azol sobre agentes fungicos.

Actualmente, tanto el incremento de micosis oportunistas como la resistencia a los antimicóticos convencionales han fomentado la búsqueda de nuevas alternativas terapéuticas que logren minimizar la problemática actual. En este contexto, fungicidas derivados del grupo azol, han sido pieza clave desde su aparición para el estudio de nuevos compuestos. Por ello, el presente estudio evalúo el efecto antifúngico in vitro de compuestos derivados de azol mediante técnicas de difusión en pocillos de agar frente a nueve cepas fúngicas; así como también, se determinó la posible toxicidad de estos compuestos mediante los ensayos MTT y rojo neutro. En su mayoría, las especies fúngicas presentaron resistencia a los tratamientos con estos compuestos. Sin embargo, el complejo PF-6 mostró una buena actividad frente a levaduras. En lo que respecta a los ensayos de citotoxicidad, los resultados mostraron una tendencia lineal en cuanto a concentración/dosis, siendo así que, a menor concentración, menor grado de mortalidad celular

Evaluación in vitro de complejos con metales de transición derivados de ligandos azoles sobre huevos embrionados de Toxocara canis.

La Toxocarosis es una enfermedad parasitaria ocasionada por larvas del género Toxocara. El parásito T. canis es uno de los tres nematodos más prevalentes en los estudios llevados a cabo en zonas urbanas de países como Perú, Argentina y México. Los huevos de T. canis (HTC) son altamente resistentes a condiciones ambientales adversas y desinfectantes químicos de uso rutinario. Entre las posibilidades de ayudar en este ámbito se han hecho investigaciones de nuevos fármacos acoplando la actividad biológica de los compuestos azólicos con las propiedades de metales como cobalto (Co), níquel (Ni), cobre (Cu), zinc (Zn) y otros metales de transición. Basado en el gran interés por la destrucción de los HTC, el objetivo de la investigación se enfoco en el uso de complejos metálicos como una alternativa ante esta problemática así como también determinar la posible toxicidad de estos complejos en células de hepatocitos murinos. La actividad nematocida se evaluó en términos de movilidad relativa (MR), mientras que la toxicidad fue evaluada por la técnica de rojo neutro. En los resultado de los ensayos in vitro se demostró que los compuestos en general tienen actividad anti-HTCs moderada. La baja motilidad de las larvas y el daño morfológico indicaron que el compuesto Ls2 tenía mayor actividad anti-HTC, además que en los ensayos de la línea celular se determinó que los complejos presentaron nula citotoxidad

Estudio de complejos metálicos con ligandos de interés biológico

Esta tesis sostiene como objetivo sintetizar nuevos compuestos de coordinación empleando como centro metálico a los cationes de Cu(II), Zn(II) y Cd(II) y como ligando orgánicos, las moléculas de cianoguanidina y o-fenantrolina. Además se aborda el estudio de las nuevas especies complejas desde una perspectiva teórica y experimental para brindar información respecto de su estructura y sus propiedades físicoquímicas y biológicas. Entre las determinaciones realizadas destacamos aquellas que han permitido conocer la estructura del nuevo complejo (IR, Raman, cristalográfico), su solubilidad en distintos solventes y mezclas de solventes (especialmente agua y agua/dmso), estabilidad térmica y en solución, especiación en un rango amplio de pH, actividad sobre sistemas enzimáticos (superóxido dismutasa y fosfatasa alcalina), actividad antibacteriana y antifúngica sobre las cepas mencionadas anteriormente (algunas de colección y otras de aislamientos autóctonos) y actividad post antimicrobiana.Facultad de Ciencias Exacta

Nuevos compuestos organometálicos con potencial actividad antiparasitaria

Los iones metálicos juegan un papel importante en organismos vivos debido a que participan de numerosos procesos biológicos. Por ejemplo, el ion ferroso en la hemoglobina es fundamental para el transporte de oxígeno, los iones calcio son un componente vital de los huesos y otros elementos de transición son esenciales para el funcionamiento de enzimas [1]. La Química Bioinorgánica es el área de la Química que estudia la función de los iones metálicos en sistemas biológicos, incluyendo el estudio de fenómenos naturales como el comportamiento de metaloproteínas, o fenómenos artificiales relacionados con la importancia de éstos en medicina y toxicología [2]. De este último punto emerge un área denominada Química Inorgánica Medicinal que está relacionada, entre otros aspectos, con el estudio y desarrollo de complejos metálicos con actividad terapéutica o de diagnóstic

Fitomedicamentos obtenidos de plantas medicinales argentinas como estrategia para la prevención y tratamiento de patógenos responsables de infecciones vaginales

En los últimos años, la investigación de productos naturales ha atraído mucha atención en todo el mundo. Las plantas medicinales se han utilizado desde la antigüedad y constituyen una importante fuente de nuevos medicamentos. El objetivo de este trabajo de Tesis Doctoral fue avanzar en el diseño de productos fitoterapéuticos para la prevención y/o tratamiento de infecciones vaginales, utilizando extractos hidroalcohólicos de especies vegetales que crecen en el noroeste de Argentina, tales como Zuccagnia punctata, Larrea cuneifolia, Larrea divaricata, Larrea nitida y Tetraglochin andina. Estas especies se utilizan en la medicina tradicional para tratar infecciones fúngicas y procesos inflamatorios.Los perfiles fitoquímicos reflejaron la presencia de taninos, flavonoides, triterpenos y/o esteroides y derivados antracénicos en todas las especies vegetales. Se detectó la presencia de cumarinas en L. divaricata y de saponinas y glucósidos cardiotónicos en T. andina.Se realizaron estudios de HPLC-ESI-MS/MS y se identificaron 23 compuestos en extractos de Z. punctata (principalmente chalconas), 50 compuestos en T. andina (en su mayoría taninos hidrolizables) y 12 compuestos en las especies de Larrea (trihidroxi-6,7ʹ ciclolignano fue encontrado solo en L. divaricata y dihidroxi-metoxi-epoxilignano en L. cuneifolia y L. nitida).Se determinó la actividad antifúngica de los extractos hidroalcohólicos de las especies vegetales frente a hongos levaduriformes aislados de infecciones vaginales. De acuerdo a los resultados obtenidos, se podrían considerar a los fitoextractos de Z. punctata, L. divaricata y L. nitida como inhibidores fuertes del crecimiento de Candida spp., L. cuneifolia como inhibidor moderado y T. andina como inhibidor moderado o débil dependiendo de la cepa analizada. Se realizaron mezclas binarias entre las cinco especies vegetales utilizando el método del tablero de ajedrez. Algunas de las combinaciones mostraron efecto sinérgico, siendo las más activas las mezclas de Z. punctata/L. nitida (Zp/Ln); Z. punctata/L. divaricata (Zp/Ld) y Z. punctata/L. cuneifolia (Zp/Lc).En general, las infecciones vaginales están asociadas a situaciones de estrés oxidativo y procesos inflamatorios, por ello se analizó la actividad de estos productos naturales como antioxidantes y antiinflamatorios. Tanto los extractos como las mezclas más activas (Zp/Ln, Zp/Ld, Zp/Lc) presentan capacidad de depurar radicales libres y especies de oxígeno reactivas, capacidad de inhibir la hemólisis oxidativa de eritrocitos humanos22y de inhibir la actividad de enzimas que participan en el proceso inflamatorio (fosfolipasa, lipooxigenasa y ciclooxigenasa).Con el propósito de garantizar el uso terapéutico seguro de los extractos y mezclas binarias de los mismos, se evaluó el efecto genotóxico a través del test de Ames, demostrando que no presentan actividad mutagénica sobre ninguna de las dos cepas utilizadas (TA98 y TA100).Se desarrollaron formulaciones farmacéuticas (óvulos, tabletas y microcápsulas) tanto de los extractos individuales como de las combinaciones más activas. Los formulados mantuvieron las actividades biológicas ensayadas, comparando con los valores obtenidos con los extractos utilizados para su formulación. Además, los formulados no mostraron contaminación biológica con hongos ni bacterias.Estos resultados indicarían que los fitoextractos (individuales o combinados) y los formulados obtenidos a partir de ellos serían una buena alternativa para el tratamiento de las infecciones fúngicas y de los procesos oxidativos asociados.In recent years, researches focused on natural products have attracted a lot of attention around the world. Medicinal plants have been used since ancient times and are an important source of new medicines. The aim of this Doctoral Thesis is to advance in the design of phytotherapeutic products for the prevention and / or treatment of vaginal infections using hydroalcoholic extracts of plant species that grow in northwestern Argentina, such as Zuccagnia punctata, Larrea cuneifolia, Larrea divaricata, Larrea nitida and Tetraglochin andina. These species are used in traditional medicine to treat fungal infections and inflammatory-related pathologies. The phytochemical study showed the presence of tannins, flavonoids, triterpenes and/ or steroids and anthracene derivatives in all plant species. Coumarins were also detected in L. divaricata, while T. andina tested positive for saponins and cardiotonic glucosides. HPLC-ESI-MS/MS studies were performed. This analysis allowed to identify 23 compounds in Z. punctata (mainly chalcones), 50 compounds in T. andina (mostly hydrolysable tannins) and 12 compounds in Larrea species (trihydroxy-6,7'ciclolignan was found only in L. divaricata and dihydroxy-methoxy-epoxilignan in L. cuneifolia and L. nitida). The plant species hydroalcoholic extracts were assayed for their anti-fungal capacity against yeast-like fungi isolated from vaginal infections. According to the results obtained, the phytoextracts of Z. punctata, L. divaricata and L. nitida could be considered as strong inhibitors of the growth of Candida spp., L. cuneifolia as a moderate inhibitor and T. andina as a moderate or weak inhibitor depending on the strain analyzed. Binary mixtures were made following the checkboard method with the five plant species. Some of the combinations showed a synergic effect, being the most active the mixtures of Z. punctata/L. nitida (Zp/Ln); Z. punctata/L. divaricata (Zp/Ld) y Z. punctata/L. cuneifolia (Zp/Lc). In general, vaginal infections are associated to oxidative stress and inflammatory processes; thus, studies on the antioxidant and anti-inflammatory properties of these natural products were carried out. The extracts and the most active mixtures (Zp/Ln, Zp/Ld, Zp/Lc) were able to scavenge free radicals and reactive oxygen species, to inhibit the oxidative hemolysis of human erythrocytes and the activity of enzymes involved in the inflammatory process (phospholipase, lipoxygenase and cyclooxygenase). To guarantee the safe therapeutic use of the extracts and mixtures, the genotoxic effect was evaluated using the Ames test, which indicated that they do not have a mutagenic activity on any of the two strains used (TA98 and TA100). Pharmaceutical preparations (ovules, tablets and microcapsules) were prepared using the individual plant species and the most active combinations. The pharmaceutical preparations maintained the biological activities when compared to the values obtained for the extracts used for their formulation. Additionally, the formulations showed no biological contamination with fungi or bacteria. These results indicate that the phytoextracts (individual or combined) and their pharmaceutical formulations would be a good alternative for the treatment of fungal infections and the associated oxidative processes.Fil: Moreno, María Alejandra

Acción antimicrobiana del Anacardium occidentale sobre Candida albicans y Staphylococcus aureus. Estudio in vitro

A escala mundial hay interés en la búsqueda de nuevos medicamentos antibacterianos para tratamientos de enfermedades infecciosas. Ante la comprobada resistencia y recurrencia de Candida albicans, Staphylococcus aureus y otras bacterias, se busca encontrar nuevos productos para el tratamiento contra estos microorganismos. El objetivo de este trabajo fue hallar la acción antifúngica del aceite de la cáscara de la nuez del Anacardium occidentale sobre Candida albicans y la actividad antibacteriana sobre Staphylococcus aureus por lo que se trabajó con cepas de la American Type Culture Collection y con cepas de pacientes portadores de VIH y de prótesis bucal. Se usó como control positivo a la Nistatina para C. albicans y Clorhexidina 2 % para S. aureus. Cada prueba se realizó por quintuplicado. Los resultados mostraron que el aceite del Anacardium occidentale no tiene actividad antifúngica, pero sí demostró tener gran actividad antibacteriana contra S. aureus, mucho mayor que la mostrada por la clorhexidina.Tesi

Evolution towards pathogenicity: Comparative analysis between Brucella and a recently isolated Pseudochrobactrum

Póster presentado Online en el XXVIII Congreso Nacional de Microbiología 28 de junio al 2 de julio, 2021 .- https://hal.inrae.fr/hal-03337244/documentLa brucelosis es una de las zoonosis bacterianas más ampliamente distribuidas en el mundo, contribuyendo de forma importante a la pobreza de muchos países en desarrollo. Ninguna de las vacunas actuales proporciona una protección completa, son virulentas para humanos e interfieren en el diagnóstico serológico. Por ello, para mejorar las vacunas actuales, es imprescindible seguirestudiando los mecanismos de virulencia de Brucella, el agente etiológico de la brucelosis. Ésta pertenece a las α-2 Proteobacteria, grupo que incluye desde bacterias ambientales hasta bacterias que han evolucionado a patógenos animales difícilmente detectados por el sistema inmune, como es el caso de Brucella. Para estudiar la evolución que se ha dado hacia la patogenicidad en esta familia y poder determinar mejor así los factores de virulencia de Brucella, es interesante comparar bacterias filogenéticamente próximas que son biológicamente diferentes. Por primera vez, se han aislado bacterias del género Pseudochrobactrum en un huésped natural de Brucella.Pseudochrobactrum es un género filogenéticamente cercano a Brucella que, hasta la fecha, sólo incluye bacterias ambientales. En este trabajo se han caracterizado estos nuevos aislamientos y teniendo en cuenta sus propiedades fisiológicas, su perfil de lípidos polares y ácidos grasos, y el análisis filogenético, se ha propuesto una nueva especie con el nombre de Pseudochrobactrum bovis. Los estudios comparativos con Brucella han revelado diferencias en la composición de la envoltura celular, el contenido genético y virulencia. Por ello, P. bovis puede representar un nuevo modelo para estudiar la evolución de Brucella hacia la virulenciaN

XXII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica (XXII CAFQI)

Recopilación de resúmenes de los trabajos presentados en el XXII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica (XXII CAFQI), llevado a cabo en modalidad virtual los días 19, 21, 23, 27 y 29 de abril de 2021 en la Universidad Nacional de La Plata.Facultad de Ciencias Exacta